Môi trường Tryptone Soya Agar (TSA)

Môi trường Tryptone Soya Agar là gì?

Tryptone Soya Agar (TSA) là môi trường nuôi cấy đa năng cho sự phát triển của nhiều loại sinh vật, bao gồm cả vi sinh vật hiếu khí và kỵ khí, những vi sinh vật này đòi hỏi điều kiện yếm khí.

Do có sự đa dạng trong nuôi cấy, môi trường Tryptone Soya Agar được sử dụng làm môi trường tăng trưởng chung để phân lập và nuôi cấy vi sinh vật.

TSA cũng được khuyến khích sử dụng trong nuôi cấy, bảo quản, bảo quản và vận chuyển vi sinh vật nuôi cấy thuần khiết.

Các tên gọi khác của môi trường TSA

Các nhà sản xuất môi trường nuôi cấy khử nước khác nhau gọi TSA bằng các tên khác, bao gồm

Casein Soya Bean Digest Agar
Soybean Casein Digest Agar
CASO Agar
Tryptic Soy Agar

Thành phần của môi trường Tryptone Soya Agar

Công thức đơn giản của môi trường TSA bao gồm hai loại pepton, natri clorua và thạch.

Thành phần	Hàm lượng (g/L)
Pancreatic digest of casein	15
Enzymatic digest of soya bean	5
Sodium chloride	5
Agar	15

pH (25°C): 7.3±0.2

Nguyên lý của môi trường Tryptone Soya Agar

Chất tiêu hóa tuyến tụy của casein và chất tiêu hóa papaic của bột đậu nành cung cấp Nitơ, Vitamin và khoáng chất.

Điều này làm cho môi trường TSA thích hợp cho sự phát triển của nhiều loại vi sinh vật khó tính và không khó tính.

Glucose phục vụ như một nguồn carbohydrate.

Phosphate đệm môi trường.

Natri clorua duy trì sự cân bằng thẩm thấu.

Agar là chất làm đông đặc.

Môi trường có thể được bổ sung máu để tạo điều kiện cho sự phát triển của vi khuẩn khó tính hơn hoặc chất kháng khuẩn để cho phép chọn lọc các nhóm vi sinh vật khác nhau từ hệ vi sinh vật thuần khiết. Giống như bất kỳ loại môi trường nuôi cấy vi sinh vật nào, những thay đổi nhỏ có thể được thực hiện để phù hợp với hoàn cảnh cụ thể.

Phương pháp chuẩn bị môi trường Tryptone Soya Agar

Hòa tan 45 gam trong 1000 ml nước cất.
Đun đến sôi để hòa tan hoàn toàn môi trường.
Khử trùng bằng nồi hấp ở áp suất 15lbs (121°C) trong 15 phút.
Làm nguội đến 45-50°C.
Trộn đều và đổ vào đĩa Petri vô trùng.
Các đĩa phải được làm ấm đến nhiệt độ phòng và bề mặt thạch phải khô trước khi cấy.
Cấy và ria mẫu càng sớm càng tốt sau khi thu thập.
Nếu mẫu cần nuôi cấy nằm trên một miếng gạc, hãy lăn miếng gạc lên một vùng nhỏ trên bề mặt thạch.
Ria để phân lập bằng vòng vô trùng.
Ủ các đĩa trong điều kiện hiếu khí ở 35-37°C trong 18-24 giờ (một số sinh vật có thể mất hơn 24 giờ để xuất hiện sự phát triển rõ rệt).
Kiểm tra hình thái khuẩn lạc.

Về cảm quan: môi trường Tryptone Soya Agar đã chuẩn bị có màu vàng rơm nhạt đến vàng rơm, bề ngoài hơi đục.

Về nhiệt độ nuôi cấy: Vì TSA là môi trường đa năng nên có thể được ủ ở các nhiệt độ khác nhau tùy thuộc vào sinh vật mục tiêu. Trong các ứng dụng giám sát môi trường, thông thường các đĩa được ủ ở 30-35°C đối với khuẩn lạc vi khuẩn và 20-25°C đối với nấm mốc và nấm.

Giải thích kết quả trên đĩa thạch môi trường Tryptone Soya Agar

Môi trường Tryptone Soya Agar sẽ hỗ trợ sự phát triển của nhiều loại vi khuẩn hiếu khí và kỵ khí nếu được ủ trong điều kiện thích hợp.

Một tập hợp các sinh vật đối chứng điển hình và việc xác định kiểu hình liên quan đến chúng là:

Vi sinh vật	Hình thái khuẩn lạc	Khả năng phát triển
Staphylococcus aureus	Smooth, Regular, Yellow/ Cream	Positive
Staphylococcus epidermidis	Smooth, Regular, Yellow/ Cream	Positive
Escherichia coli	Smooth, Regular, Cream	Positive
Bacillus subtilis	Irregular, Regular, Cream	Positive
Pseudomonas aeruginosa	Smooth, Regular, Cream	Positive
Candida albicans	Smooth, Regular, Cream	Positive
Aspergillus brasiliensis	Irregular, White to black	Positive
Salmonella typhimurium		Positive

Ứng dụng của môi trường Tryptone Soya Agar

Môi trường TSA được sử dụng cho nhiều ứng dụng, bao gồm bảo quản môi trường nuôi cấy, đếm tế bào (đếm), phân lập môi trường nuôi cấy thuần khiết hoặc đơn giản là nuôi cấy nói chung.

Tryptone Soya Agar hỗ trợ sự phát triển của nhiều loại sinh vật bao gồm cả fastidious and non- fastidious như Neisseria, Listeria và Brucella… Trong một số mục đích, có thể bổ sung thêm dextrose, natri clorua và agar để nuôi cấy Salmonella typhi.

TSA thường là môi trường cơ bản của các loại đĩa thạch khác. Ví dụ, các đĩa thạch máu (BAP) được tạo ra bằng cách làm giàu các đĩa TSA bằng máu cừu đã khử fibrin, và thạch sô cô la được tạo ra bằng cách nấu thêm BAP.

Môi trường Tryptone Soya Agar có thể được sử dụng để xác định yếu tố X, V và XV ở các loài Hemophilus bằng cách sử dụng các dải có các yếu tố X, V và XV trong các đĩa cấy.

Môi trường Tryptone Soya Agar có bổ sung muối có thể hữu ích trong việc xác định mức độ chịu ánh sáng của vi sinh vật.

Môi trường Tryptone Soya Agar thường được sử dụng để thử nghiệm môi trường sạch trong lĩnh vực dược phẩm và cơ sở vô trùng.

Môi trường TSA rất hữu ích trong việc kiểm tra nước, mỹ phẩm, công nghiệp, thực phẩm và đồ uống.

Tryptone Soya Agar cũng có thể được sử dụng làm môi trường để duy trì hoặc nuôi cấy các chủng tham chiếu, ví dụ, Enterobacteriaceae và Staphylococci.

Giới hạn của môi trường Tryptone Soya Agar

Môi trường TSA không thể được sử dụng để phân lập mầm bệnh từ mẫu bệnh phẩm.

Việc ứng dụng Tryptone Soya Agar trong vi sinh học còn hạn chế vì bản thân thành phần dinh dưỡng của TSA không thúc đẩy sự phát triển của một số loại vi khuẩn khó tính.

*** Xem thêm: Môi trường PDA – Potato Dextrose Agar